Усулҳои асосии электрофорези агароз гел (1)

1. Тасниф

Электрофорези гелӣ ба навъҳои амудӣ (аз ҷумла гелҳои сутун ва гелҳои плита) ва уфуқӣ (асосан гелҳои плита) тақсим мешавад (расми 6-18). Умуман, ҷудокунии амудӣ аз уфуқӣ каме бартарӣ дорад, аммо тайёр кардани гели уфуқӣ ҳадди аққал чаҳор бартарият дорад: дар зери тамоми гел дастгирӣ мавҷуд аст, ки имкон медиҳад агарозаи консентратсияи паст истифода шавад; тайёр кардани пластинхои гели агарозии хусусиятхои гуногун имконпазир аст; тайёр кардани гел ва боркунии намуна қулайтар аст; камераи электрофорез сохтан осон ва камхарч аст. Азбаски электрофорези уфуқӣ бо пластинкаи гели агарозӣ пурра тақрибан 1 мм поёнтар аз сатҳи буфери электрофорез ғарқ карда мешавад, онро электрофорези зериобшуда низ меноманд.

图片2

Танки электрофорези DYCP-31DN барои электрофорези гели агароз

2.Системаи буферӣ

Ҳангоми ҷудокунии кислотаи нуклеинӣ, аксари системаҳо системаҳои муттасилро қабул мекунанд. Буферҳои электрофорези маъмулан истифодашаванда TBE (0.08mol/L Tris·HCl, pH 8.5, 0.08mol/L кислотаи бор, 0.0024mol/L EDTA) ва THE (0.04mol/L Tris·HCl, pH 7.8, 0.02mol/L) мебошанд. ацетат натрий, 0,0018мол/л EDTA) буфер. Ин буферҳо одатан ҳамчун маҳлулҳои 10x омода карда мешаванд ва ҳангоми истифода ба консентратсияи зарурӣ ҳал карда мешаванд. Суръати муҳоҷирати ДНК-и хатӣ ва даврашакл дар гели агароз вобаста ба буфери истифодашуда фарқ мекунад. Дар буфер суръати муҳоҷирати ДНК-и хатӣ нисбат ба ДНК даврашакл зиёдтар аст, дар буфери TBE бошад, баръакс.

3

3. Тайёр кардани гели агароза

(1) Омода кардани гели агарозаи уфуқӣ

(а) Консентратсияи лозимии гели агарозро бо истифода аз буфери 1х электрофорез омода кунед.

(б) Агарозаро гарм кунед, то ки дар ванна оби ҷӯшон, дар омехтаи магнитӣ ё дар печи микроволновка ба анҷом расад. Маҳлули агарозро то 55°С хунук кунед ва ба консентратсияи ниҳоии 0,5 мкг/мл ранги бромиди этидиум (ЭБ) илова кунед.

(в) кунҷҳои плитаҳои шиша ё акрилиро бо миқдори ками гели агароз мӯҳр кунед, шона илова кунед ва дандонҳои шонаро тақрибан 0,5 ~ 1,0 мм болотар аз табақ ҷойгир кунед.

(г) Маҳлули агарозии гудохташударо пайваста ба қолаби шиша ё табақчаи акрилӣ рехт (ғафсӣ аз ҳаҷми намунаи ДНК вобаста аст), аз ворид шудани футурҳои ҳаво пешгирӣ кунед. Бигзор он дар ҳарорати хонагӣ ба таври табиӣ сахт шавад.

(д) Шонаро пас аз сахт шудан бодиққат хориҷ кунед. Миқдори мувофиқи буфери электрофорезро ба зарфи гел илова кунед ва боварӣ ҳосил кунед, ки плитаи гел тақрибан 1 мм аз сатҳи буфери электрофорез ғарқ мешавад.

(2) Омода кардани гели амудии агароза

(a) Равған ё боқимондаҳоро аз табақҳои шишагӣ бо шустани этанол тоза кунед.

(б) Дар байни сарбандҳои пеш ва қафо плитаҳои фосилавӣ ҷойгир кунед, кунҷҳои плитаҳои ҷудокуниро бо сарбандҳои пеш ва қафо мувофиқ кунед ва онҳоро бо кликҳо мустаҳкам кунед.

(в) 2% агарозаро дар буфери 1х дар байни кунҷҳои плитаҳои фосилавӣ илова кунед, то дар поёни камераи рехтагарии гел сими агарозии баландиаш 1 см ташкил кунед.

(г) Гели агарозии гудохташударо дар консентратсияи дилхоҳ, ки дар буфери 1х тайёр карда шудааст, ба камераи гел то 1 см поёнтар аз боло рехт.

(д) Шонаро дар зери дандонҳои шона гузоред. Баъзан ҳангоми хунуккунии гели агарозӣ дар дандонҳои шона узвҳо пайдо мешаванд; дар чунин ҳолатҳо, танҳо каме агарозаи гудохташударо дар боло илова кунед, то онро мустаҳкам кунед.

(е) Шонаро хориҷ кунед. Барои пешгирии хуруҷи буфер дар ковокии боркунӣ, пайвасти байни пластинкаи гели агарозӣ ва камераи электрофорезро бо агарозаи 2% маҳкам кунед ва миқдори зарурии буферро илова кунед.

(г) 1х буфери электрофорезро ба камераи гел илова кунед.

(з) Намунаҳои ДНК-ро ба гели агароз дар зери буфер бодиққат бор кунед.

3

Маълумоти бештар дар бораи донишҳои асосӣ дар бораи электрофорези gel gel, мо ҳафтаи оянда мубодила хоҳем кард. Мехоҳед, ки ин маълумот барои таҷрибаи шумо муфид бошад.

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) дар тӯли зиёда аз 50 сол бо дастаи касбии техникии худ ва маркази R&D дар истеҳсоли асбобҳои электрофорез тахассус дорад. Мо хатти боэътимод ва мукаммали истеҳсолӣ аз тарҳрезӣ то санҷиш ва анбор ва инчунин дастгирии маркетинг дорем. Маҳсулоти асосии мо ҳуҷайраҳои электрофорез (танк / камера), таъминоти барқи электрофорез, трансиллюминатори кабуд, трансиллюминатори ултрабунафш, системаи таҳлили гелӣ ва ғайра мебошанд.

Ҳоло мо шариконро меҷӯем, ҳам зарфи электрофорези OEM ва ҳам дистрибюторҳо истиқбол мешаванд.

Агар шумо ягон нақшаи хариди маҳсулоти моро дошта бошед, лутфан бо мо тамос гиред. Шумо метавонед ба мо тавассути почтаи электронӣ паём фиристед[почтаи электронӣ ҳифз шудааст]ё[почтаи электронӣ ҳифз шудааст], ё лутфан ба мо занг занед +86 15810650221 ё Whatsapp +86 15810650221 ё Wechat: 15810650221 илова кунед.

Лутфан рамзи QR-ро скан кунед, то дар Whatsapp ё WeChat илова кунед.

2


Вақти фиристодан: Декабр-07-2023