Усулҳои асосии электрофорези агароз гел (2)

Омодасозии намуна ваБор карда мешавад

Аз сабаби истифодаи системаи доимии буферӣ бе stacking gel дар аксари ҳолатҳо, намунаҳо бояд консентратсияи мувофиқ ва ҳаҷми хурд дошта бошанд. Истифода апипеткаки охиста-охиста намунаро бо 5—10 мкг ба хар чох илова кунед, то ки ба хеле кам шудани резолюция рох надихад. Кайнамунаи боркунӣ, кувваи электр бояд хомуш карда шавад. Намуна бояд дорои ранги индикаторӣ (0,025% кабуд бромофенол ё норанҷӣ) ва сахароза (10-15%) ё глицерин (5-10%) бошад, то зичии он зиёд шавад, консентратсияи намуна ва пешгирии паҳншавӣ. Бо вуҷуди ин, баъзан сахароза ё глицерин метавонад дар натиҷаи электрофорез бандҳои U-шаклро ба вуҷуд орад, ки бо истифода аз 2,5% Фиколл (поливинилпирролидон) пешгирӣ кардан мумкин аст.

1

Электрофорез

Шиддати электрофорез 5-15 В/см, одатан тақрибан 10 В/см мебошад. Барои ҷудо кардани молекулаҳои калон шиддат бояд камтар бошад, одатан аз 5 В/см зиёд набошад.

2

Ранг кардан

Рангҳои флуоресцентӣ бромиди этидиум (EB) одатан барои ранг кардан барои мушоҳидаи бандҳои ДНК дар гели агароз истифода мешавад. EB метавонад дар байни ҷуфтҳои асосии молекулаҳои ДНК ҷойгир карда шавад, ки EB бо ДНК пайваст шавад. Азхудкунии нури ултрабунафш 260 нм аз ҷониби ДНК ба EB интиқол дода мешавад ва EB-и пайвастшуда дар 590 нм дар минтақаи сурх-норинҷии спектри равшани намоён флуорессенсия мебарорад. Ранг кардани гел дар маҳлули 1 ммоль/л MgSO4 дар тӯли 1 соат метавонад флуорессенсияи заминаро, ки дар натиҷаи EB-и бебанд ба вуҷуд омадааст, коҳиш дода, барои ошкор кардани миқдори ками ДНК мусоидат мекунад.

Рангҳои EB як қатор афзалиятҳо доранд: истифодааш осон аст, кислотаҳои нуклеинро вайрон намекунад, ҳассосияти баланд дорад ва метавонад ҳам ДНК ва ҳам РНК-ро доғдор кунад. EB-ро дар вақти дилхоҳ ба намуна илова кардан ва бо истифода аз абсорбсияи ултрабунафш пайгирӣ кардан мумкин аст. Пас аз ранг кардан, EB-ро тавассути экстраксия бо n-бутанол нест кардан мумкин аст.

Бо вуҷуди ин, ранги EB мутагени пурқувват аст ва ҳангоми коркард чораҳои эҳтиётӣ, ба монанди пӯшидани дастпӯшакҳои полиэтиленӣ бояд андешида шаванд. Акридин афлесун низ як рангест, ки маъмулан истифода мешавад, зеро он метавонад байни кислотаҳои нуклеинҳои якқатор ва дуқабата (ДНК, РНК) фарқ кунад. Он флуорессенсияи сабз (530 нм) барои кислотаҳои нуклеинҳои дуқабата ва флуорессенсияи сурх (640 нм) барои кислотаҳои нуклеинҳои якқаторро намоиш медиҳад. Илова бар ин, рангҳои дигар, аз қабили кабуди метилен, сабзи метилен ва хинолин В метавонанд барои ранг кардан истифода шаванд.

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) дар тӯли зиёда аз 50 сол бо дастаи касбии техникии худ ва маркази R&D дар истеҳсоли асбобҳои электрофорез тахассус дорад. Мо хатти боэътимод ва мукаммали истеҳсолӣ аз тарҳрезӣ то санҷиш ва анбор ва инчунин дастгирии маркетинг дорем. Маҳсулоти асосии мо ҳуҷайраҳои электрофорез (танк / камера), таъминоти барқи электрофорез, трансиллюминатори кабуд, трансиллюминатори ултрабунафш, системаи таҳлили гелӣ ва ғайра мебошанд.

3

Ҳоло мо шариконро меҷӯем, ҳам зарфи электрофорези OEM ва ҳам дистрибюторҳо истиқбол мешаванд.

Агар шумо ягон нақшаи хариди маҳсулоти моро дошта бошед, лутфан бо мо тамос гиред. Шумо метавонед ба мо тавассути почтаи электронӣ паём фиристед[почтаи электронӣ ҳифз шудааст]ё[почтаи электронӣ ҳифз шудааст], ё лутфан ба мо занг занед +86 15810650221 ё Whatsapp +86 15810650221 ё Wechat: 15810650221 илова кунед.

Лутфан рамзи QR-ро скан кунед, то дар Whatsapp ё WeChat илова кунед.

2


Вақти интишор: Декабр-20-2023