Принсип
Плёнкаи целлюлоза ацетат электрофорез як усули электрофорез мебошад, ки плёнкаи ацетати селлюлозаро ҳамчун такя истифода мебарад. Ходисае, ки дар зери таъсири майдони электр ба суи электроди мукобил харакат кардани заррачахои заряднокро электрофорез меноманд. Азбаски ҳар як сафеда нуқтаи изоэлектрикии мушаххас дорад, агар сафеда дар маҳлули дорои рН аз нуқтаи изоэлектрикӣ пасттар ҷойгир карда шавад, сафеда заряди мусбат дорад ва ба сӯи электроди манфӣ ҳаракат мекунад. Баръакс, он ба қутби мусбат мегузарад. Азбаски суръати харакати молекулахои сафеда дар майдони электрики ба заряди онхо, шакл ва андозаи молекулахо вобаста аст, бо рохи электрофорез сафедахои гуногунро чудо кардан мумкин аст. Зардоб сафедаҳои гуногун дорад, ки ҳамаи онҳо нуқтаҳои изоэлектрикӣ дар pH7,5 ё камтар доранд. Вақте ки хуноба дар буфери pH 8,6 ҷойгир карда мешавад, то электрофорез анҷом дода шавад, ҳама сафедаҳои хуноба манфӣ заряднок мешаванд ва дар майдони электрикӣ ба тарафи мусбат ҳаракат мекунанд. Азбаски сафедаҳои гуногуни зардоб дар як рН зарядҳои гуногун доранд, зарраҳои молекулавӣ аз ҷиҳати ҳаҷм гуногунанд ва аз ин рӯ суръати муҳоҷират гуногун аст ва онҳо тавассути электрофорез ҷудо карда мешаванд. Нуқтаҳои изоэлектрикӣ ва вазнҳои молекулавии сафедаҳои зардоб дар ҷадвали зерин нишон дода шудаанд:
| Протеин | Нуқтаҳои изоэлектрикӣ (PI) | Вазни молекулавӣ |
| Альбумин | 4.88 | 69 000 |
| α1-глоулин | 5.00 | 200 000 |
| α2-глоулин | 5.06 | 300 000 |
| β-глоулин | 5.12 | 9 000 ~ 150 000 |
| γ-глоулин | 6.85 ~ 7.50 | 156 000 ~ 300 000 |
Таҷриба аз он иборат аст, ки сафедаҳои гуногун дар хунобаи хун бо мембранаи ацетати целлюлоза (ихтисор. CAM) ҳамчун васоити дастгирӣ ҷудо карда шаванд. CAM як навъ лӯлаҳои кафкшуда мебошадeфилм бо либоси хуб, ва ғафсӣ 0.1mm-1.5mm аст, ки дорои азхудкунии об муайян.
Маводҳо, асбобҳо ва реактивҳо барои электрофорези CAM
Намунаҳо:зардоби хуни одами солим
Асбоб:таъминоти барқ DYY-6C, зарфи электрофорези DYCP-38C, боркунии намунаи олӣ WD-9404
Реактивхо
1) мембранаи ацетати целлюлоза 7X9 см
2) Маҳлули буферии PH 8,6 барбитол (қувваи ионӣ 0,05-0,09, вақти он 0,06 тид аст.): 1,84 г кислотаи диэтилбарбитурӣ гирифта, сипас 1,03 г диэтил натрий пентобарбитал гирифта, каме оби дистиллшударо барои гарм кардани об илова кунед ва ҳал кунед. то 1000 мл;
3) доғ: Ponceau S 0,2g, Trichloroacetic 3g, илова кардани 100 мл оби тозашуда;
4) TBS/T ё PBS/T: 45мл 95% этанол, 5мл кислотаи сиркоии пирях, 50мл оби соф илова кунед;
5) Маҳлули тозакунӣ: 70 мл этаноли беоб, 30 мл кислотаи сиркоии пирях.
Усули таҷрибаd
1) Мембранаро тайёр кунед: Мембранаро ба маҳлули буферии барбитол 30 дақиқа то 8 соат ғарқ кунед ва онро берун кунед, маҳлули иловагиро бо коғази абсорбент хориҷ кунед.
2) Боркунии намунаҳо: Тарафи ноҳамвор ва ҳамвори мембранаро фарқ кунед ва дар масофаи 1,5 см то охири боло дар тарафи ноҳамвор хатеро қайд кунед. Намунаҳоро бо асбоби олии боркунии намуна дар тарафи ноҳамвор бор кунед. Эзоҳ: Намунаҳо бояд ба тарафи ноҳамвор аз мембрана бор карда шаванд. Пас аз он ки намунаҳои зардоб ба мембрана пурра ворид карда мешаванд, мембранаро гардонед, тарафи ноҳамворро (бо намунаҳо) рӯ ба поён ба зарф гузоред ва нуги бо намунаҳо дар электроди манфӣ ҷойгир карда мешавад.
3) Электрофорез: Даргиронидани қувваи барқ, 0,4～Мембранаи 0,6м А/см, мухлати кор 30-45 дакика аст. Пас аз анҷом додани электрофорез, барқро хомӯш кунед.
4) Доғдор ва тоза кунед: Мембранаро аз зарф берун кунед ва ғарқ кунедit ба маҳлули ранг барои 5 дақиқа гузоред ва сипас онро дар маҳлули тозакунӣ 3-4 маротиба то равшан шудани ранги замина тоза кунед. Протеинҳои зардоб бояд дар бандҳо нишон дода шаванд ва одатан панҷ минтақа мавҷуданд, ки охири болоро то хати ишорашуда ташкил медиҳанд, Альбумин, α1-глоулин, α2-глоулин, β-глоулин, γ-глоулин.
5) Консерватсия: электрофорези хушкро гузоредбанддар маҳлули тозакунанда 10-15 дақиқа нигоҳ доред ва сипас онро бароварда ба шишаи тоза часпонед, пас аз хушк шуданаш плёнкаи шаффоф мегардад.банд.
ТаҷрибаНатиҷа
Таъсири ҷудокунии намунаҳои хуноба хуб аст ва падидаи бандбандии банд вуҷуд надорад. Такрорпазирии натиҷаҳо вобаста ба тартиби санҷиш ва усулҳои озмоишгар фарқ мекунад ва такрорпазирӣ баланд аст.
Хулоса
Системаи зуд муайянкунии электрофорези клиникӣ (Зарфҳои электрофорезDYCP-38C,таъмини нерӯDYY-6C ва намунаи олӣ боркунии WD-9404) аз ҷониби мо истеҳсол карда мешавадширкати Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltdба талаботи таҷрибавӣ мувофиқат мекунад,ванатиҷаҳо такроршаванда, оддӣ ва зуд мебошанд, мувофиқандтаълимтадқиқот.
Пекин ЛюййBiotechnology Co., Ltd ба истеҳсоли маҳсулоти электрофорез барои соҳаи илмҳои ҳаёт тахассус дорад, кидорои таърихи зиёда аз 50-сола дар Чин ва ширкат метавонад дар тамоми ҷаҳон маҳсулоти устувор ва босифат таъмин намояд. Дар тӯли солҳои рушд, он сазовори интихоби шумост!
Ҳоло мо шариконро меҷӯем, ҳам зарфи электрофорези OEM ва ҳам дистрибюторҳо истиқбол мешаванд.
Барои маълумоти бештар дар бораи мо, лутфан бо мо тавассути почтаи электронӣ тамос гиред[почтаи электронӣ ҳифз шудааст]ё[почтаи электронӣ ҳифз шудааст].
Вақти фиристодан: Ноябр-14-2022