Мо ҳафтаи гузашта якчанд мулоҳизаҳоро оид ба истифодаи электрофорези мембранаи ацетати селлюлоза мубодила кардем ва мо имрӯз ин мавзӯъро барои истинод ба анҷом мерасонем.
Интихоби Консентратсияи буфер
Консентратсияи буферӣ, ки дар электрофорези мембранаи ацетати селлюлоза истифода мешавад, одатан назар ба он ки дар электрофорези коғазӣ истифода мешавад, камтар аст.рН 8,6 маъмулан истифода мешавадBбуфери арбиталӣ одатан дар доираи 0,05 мол / л то 0,09 мол / л интихоб карда мешавад.Ҳангоми интихоби консентратсия пешакӣ муайян карда мешавад.Масалан, агар дарозии рахи мембранаи байни электродхо дар камераи электрофорез 8—10 сантиметр бошад, ба хар сантиметри дарозии мембрана шиддати 25 В зарур аст ва шиддати чараён бояд ба хар сантиметри бари мембрана 0,4—0,5 мА бошад.Агар ин арзишҳо ҳангоми электрофорез ба даст наоянд ё аз ҳад зиёд зиёд нашаванд, консентратсияи буферро зиёд кардан ё илова кардан лозим аст.
Консентратсияи аз ҳад зиёди буферӣ ба ҳаракати босуръати бандҳо ва афзоиши паҳнои банд оварда мерасонад.Аз тарафи дигар, консентратсияи аз ҳад зиёди буферӣ муҳоҷирати бандро суст карда, фарқ кардани бандҳои ҷудогонаро душвор мегардонад.
Бояд гуфт, ки дар электрофорези мембранаи ацетати селлюлоза кисми зиёди чараён ба воситаи намуна гузаронида мешавад, ки он микдори зиёди гармиро ба вучуд меорад.Баъзан, консентратсияи буферии интихобшуда метавонад мувофиқ ҳисобида шавад.Бо вуҷуди ин, дар шароити баландшавии ҳарорати муҳити зист ё ҳангоми истифодаи шиддати баланд, бухоршавии об аз гармӣ метавонад шиддат ёбад, ки дар натиҷа консентратсияи аз ҳад зиёди буферӣ ва ҳатто хушк шудани мембрана гардад.
Ҳаҷми намуна
Дар электрофорези мембранаи ацетати селлюлоза миқдори ҳаҷми намуна бо омилҳои гуногун, аз ҷумла шароити электрофорез, хосиятҳои худи намуна, усулҳои рангкунӣ ва усулҳои ошкор муайян карда мешавад.Ҳамчун принсипи умумӣ, усули муайянкунӣ ҳассостар бошад, ҳаҷми намуна метавонад камтар бошад, ки барои ҷудокунӣ муфид аст.Агар ҳаҷми намуна аз ҳад зиёд бошад, намунаҳои ҷудошавии электрофоретикӣ метавонанд равшан набошанд ва ранг кардан низ метавонад вақтро талаб кунад.Бо вуҷуди ин, ҳангоми таҳлили миқдорӣ бандҳои рангшудаи ҷудошуда бо истифода аз усулҳои муайянкунии колориметрии элютсионӣ, ҳаҷми намуна набояд хеле хурд бошад, зеро он метавонад боиси паст шудани арзишҳои ҷаббида барои ҷузъҳои муайян гардад ва боиси хатогиҳои зиёд дар ҳисобкунии мундариҷаи онҳо гардад.Дар чунин ҳолатҳо, ҳаҷми намуна бояд ба таври мувофиқ зиёд карда шавад.
Одатан, ҳаҷми намунае, ки дар ҳар як сантиметри хати татбиқи намуна илова карда мешавад, аз 0,1 то 5 мкл аст, ки ба миқдори намуна аз 5 то 1000 мкг баробар аст.Масалан, ҳангоми таҳлили муқаррарии электрофорези сафедаи хуноба, ҳаҷми намунае, ки ба ҳар сантиметри хати татбиқ илова карда мешавад, одатан аз 1 мкл зиёд нест, ки ба 60 то 80 мкг протеин баробар аст.Бо вуҷуди ин, ҳангоми таҳлили липопротеинҳо ё гликопротеинҳо бо як усули электрофорез, ҳаҷми намуна бояд мутаносибан зиёд карда шавад.
Хулоса, ҳаҷми мувофиқтарини намуна бояд дар асоси шароити мушаххас тавассути як қатор таҷрибаҳои пешакӣ интихоб карда шавад.
Интихоби маҳлули рангкунӣ
Бандҳои ҷудошуда дар электрофорези мембранаи ацетати селлюлоза одатан пеш аз ошкор ранг карда мешаванд.Қисмҳои гуногуни намуна усулҳои рангкунии гуногунро талаб мекунанд ва усулҳои рангкунӣ, ки барои электрофорези мембранаи селлюлоза ацетат мувофиқанд, метавонанд ба коғази филтр комилан мувофиқ набошанд.
Се принсипи асосии интихоби ҳалли рангкунӣ вуҷуд дорадмембранаи ацетати целлюлоза.Аввалан,Рангҳои дар об ҳалшавандаро нисбат ба рангҳои дар спирт ҳалшаванда афзалтар донистан лозим аст, то аз камшавии мембрана ва деформатсия дар натиҷаи маҳлули рангкунии охирин пешгирӣ карда шавад.Пас аз ранг кардан, муҳим аст, ки мембранаро бо об шуста, давомнокии рангро кам кунед.Дар акси ҳол, мембрана метавонад печида ё хурд шавад, ки ба муайянкунии минбаъда таъсир мерасонад.
Сониян, барои намуна интихоб кардани рангҳо бо тобиши сахти рангоранг беҳтар аст.Дар электрофорези мембранаи ацетати селлюлоза сафедаҳои хуноба, аминокислотаи 10B маъмулан аз сабаби наздикии қавии ранг кардани он ба ҷузъҳои гуногуни сафедаи хуноба ва устувории он истифода мешавад.
Сеюм, бояд рангҳои боэътимоди хушсифат интихоб карда шаванд.Баъзе рангҳо, сарфи назар аз ҳамон ном, метавонанд дорои ифлосиҳо бошанд, ки пас аз рангкунӣ дар заминаи махсусан торикӣ ба вуҷуд меоянд.Ин ҳатто метавонад бандҳои дар аввал хуб ҷудошударо норавшан кунад ва фарқ кардани онҳоро душвор гардонад.
Ниҳоят, интихоби консентратсияи маҳлули рангкунӣ муҳим аст.Аз ҷиҳати назариявӣ, чунин ба назар мерасад, ки консентратсияи баландтари маҳлули рангкунӣ ба рангкунии ҳамаҷонибаи ҷузъҳои намуна ва натиҷаҳои беҳтари рангкунӣ оварда мерасонад.Аммо, ин тавр нест.Наздикии ҳатмӣ байни ҷузъҳои намуна ва ранг дорои маҳдудияти муайяне мебошад, ки бо афзоиши консентратсияи маҳлули рангкунӣ зиёд намешавад.Баръакс, консентратсияи аз ҳад зиёди маҳлули рангкунӣ на танҳо рангро хароб мекунад, балки ба даст овардани заминаи равшанро душвор мегардонад.Ғайр аз он, вақте ки шиддатнокии ранг ба ҳадди ниҳоии муайян мерасад, каҷи ҷабби ранг ба муносибати хаттӣ пайравӣ намекунад, махсусан дар андозагирии миқдорӣ. Дар электрофорези мембранаи ацетати селлюлоза, консентратсияи маҳлули рангкунӣ одатан нисбат ба он, ки дар электрофорези коғаз истифода мешавад, пасттар аст.
Тафсилот дар бораи биотехнологияи Пекин Люйи's мембранаи ацетати целлюлозазарфи электрофорез ва истифодаи электрофорези он, лутфан ба ин ҷо муроҷиат кунед:
лТаҷриба барои ҷудо кардани сафедаи хуноба тавассути мембранаи ацетати селлюлоза
лЭлектрофорези мембранаи ацетати целлюлоза
лҲангоми истифодаи электрофорези мембранаи селлюлоза ацетати якчанд нуктаҳоро бояд дар хотир дошт (1)
Агар шумо ягон нақшаи хариди маҳсулоти моро дошта бошед, лутфан бо мо тамос гиред.Шумо метавонед ба мо тавассути почтаи электронӣ паём фиристед[почтаи электронӣ ҳифз шудааст]ё[почтаи электронӣ ҳифз шудааст], ё лутфан ба мо занг занед +86 15810650221 ё Whatsapp +86 15810650221 ё Wechat: 15810650221 илова кунед.
Истинод:Электрофорез (нашри дуюм) аз ҷониби ҷаноби Ли
Вақти фиристодан: июн-06-2023